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氣相液氮運輸罐短期儲存胚胎的可行性研究材料和方法(下)

時間:2019-05-21 13:34來源:未知 作者:班德液氮罐 點擊:
1.6胚胎冷凍   和平精英游戏模式怎么选择
采用玻璃化冷凍的方法。先將l mol/L的DMso在寶溫下平衡,DAP2 1 3和冷凍管(NuncCryoTllbe 1.0 lI】1)在O℃平衡。將要冷凍的胚胎移入1 mol/L的DMSO的液滴里,讓其自然沉到液滴底部,重復3次以盡可能地去除HTF。將5肛11 mol/L的DMSO和胚胎一同移入提前預冷的冷凍管中,O℃平衡5 s后,加入45 ul的DAP213,再在O℃平衡5s,將冷凍管裝到冷凍管夾直接投入液相和平精英游戏模式怎么选择。第二天將冷凍管從液相和平精英游戏模式怎么选择轉入到氣相液氮運輸罐,存放14 d后放回液相液氮罐。每種品系均留一個冷凍管的胚胎不放入氣相液氮運輸罐,作為對照。

1.7胚胎復蘇
將冷凍管從液相液氮罐中取出,倒出冷凍管里的液氮,在室溫卜.放置20s。加入37℃預熱的0.25Ino兒蔗糖0.9 rnl,迅速吸取注入10次,將蔗糖和胚胎移到培養皿里,再往冷凍管里加O.25 TI】ol/L蔗糖O.45 IIll,回收胚胎。將形態正常的胚胎在HTF里洗3次以充分吸取冷凍?;ひ?,最后移入HTF液滴里培養,并計數。培養1 h后進行移植。

1.8移植
在移植前一天下午挑出8周齡以上發情期lcR小鼠與結扎的ICR雄性小鼠合籠。第二天挑出有陰栓的雌性小鼠做移植用。移植采用輸卵管移植。一般在移植后的第20天分娩,計數。

1.9統計方法
用卡方檢驗對兩組數據進行分析比較,P.<0.05為差異顯著。和平精英游戏模式怎么选择
 

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